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大鼠原代脂肪间充质干细胞提取:南宫28NG相信品牌力量

发布时间:2025-02-03   信息来源:宰珊璐

南宫28NG相信品牌力量,在生物医疗领域的研究中,大鼠原代脂肪间充质干细胞的提取是基础且重要的步骤。本实验以SD大鼠为研究对象,以下为实验所需材料与步骤。

大鼠原代脂肪间充质干细胞提取:南宫28NG相信品牌力量

一、实验材料准备

选择约2周龄或体重约200克的SD大鼠为实验对象。同时,准备好灭菌器械,包括镊子、眼科直剪、眼科弯剪、磁珠等。此外,还需准备5mL注射器、0.22μm滤器、泡沫板、图钉固定大鼠。使用75%乙醇进行消毒,同时准备预冷的无菌PBS水、15mL和50mL无菌离心管、细胞筛、无菌培养瓶等。培养基使用SD大鼠脂肪间质干细胞完全培养基。

二、实验操作步骤

将所有实验材料放置于超净工作台进行紫外线消毒30分钟。接着,配制约5mL的0.1%Ⅰ型胶原酶,并进行除菌过滤。在将大鼠处死后,脱颈浸泡于75%酒精中2-3分钟,然后固定于泡沫板上。小心剪开大鼠腹股沟区域的皮肤,暴露出脂肪组织。

仔细剪下脂肪组织并放入PBS中,过程中需避免损伤血管。使用PBS清洗脂肪组织,清除多余的血管和淋巴结。将脂肪组织切成适宜大小(如2mm×2mm),加入胶原酶溶液进行37℃下的消化,期间每5分钟轻轻震荡或持续搅拌。消化完成后,将细胞悬液转移至离心管中进行离心,弃去上层脂滴泡沫和上清液,用培养基重悬沉淀。

再次过滤细胞悬液,经离心后弃去上清,再次以培养基重悬,并接种到无菌培养瓶中。最后,将培养瓶放入37℃、包含5%CO₂的培养箱中进行培养。

三、注意事项

在实验过程中,要始终保持无菌操作以防止细胞污染。脂肪组织的剪取及清洗需特别细致,以避免损伤细胞或引入杂质。在消化时,应严格控制时间和温度,以防止过度消化导致细胞损伤。在离心和过滤过程中,务必轻柔操作,以避免细胞损失或破裂。

通过上述步骤,能够有效提取大鼠的脂肪间充质干细胞。南宫28NG相信品牌力量,为生物医疗的研究提供强有力的支持和保障。